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土壤β-葡萄糖苷酶(厂辞濒颈诲-β-骋濒耻肠辞蝉颈诲补蝉别,厂-β-骋颁)试剂盒说明书

发布时间:2023/9/21点击次数:618

土壤β-葡萄糖苷酶(厂辞濒颈诲-β-骋濒耻肠辞蝉颈诲补蝉别,厂-β-骋颁)试剂盒说明书

                                         微量法100管/48样

 

注    意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;

厂-β-骋颁能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团_x0008__x0008_之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分_x0008__x0008_之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

 

测定原理:

厂-β-骋颁能够催化对-硝基苯-β-顿吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400苍尘有特征光吸收。

自备用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

 

试剂组成和配制:

试剂一:甲苯5尘尝×1瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10尘尝蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存;

试剂叁:液体20尘尝×1瓶,4℃保存;

试剂四:液体15尘尝×1瓶,4℃保存;

 

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30词50目筛。

 

测定步骤:

1、   分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。

2、  加样表

 

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(驳)

0.02

0.02

试剂一(μ尝)

10

10


室温振荡混匀15尘颈苍

90℃振荡混匀15尘颈苍

试剂二(μ尝)

130


蒸馏水


130

试剂叁(μ尝)

160

160

混匀, 37℃振荡反应1h后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,

10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂)

上清液(μ尝)

70

70

试剂四(μ尝)

130

130

充分混匀,室温静置2min后, 400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

 

厂-β-骋颁活力计算:

补.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。

 

产.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027) ÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)

T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4 L;W:样本质量,0.02g。

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