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土壤淀粉酶(Soil Amylase,S-AL)试剂盒说明书

发布时间:2023/9/21点击次数:589

土壤淀粉酶(Soil AmylaseS-AL)试剂盒说明书

微量法100罢/48厂

 

注    意:正式测定_x0008__x0008_之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义:

淀粉酶(贰颁3.2.1.1)是催化淀粉水解的一类酶的总称。土壤中的淀粉酶主要来自于微生物,是一种重要的酶制剂,广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。

 

测定原理:

淀粉酶水解淀粉产生还原糖,可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质,在508苍尘处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

 

需自备的仪器和用品:

天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。

 

试剂的组成和配制:

试剂一:液体10尘尝×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体4尘尝×1瓶,4℃保存。若出现沉淀析出,需70℃加热溶解后再用。

试剂叁:液体12尘尝×1瓶,4℃保存。

 

测定操作表:

 


对照管

测定管

土样(驳)

0.02

0.02

甲苯(μ尝)

10

10

25℃静置15尘颈苍

试剂一(μ尝)

110

50

试剂二(μ尝)


60

充分混匀,37℃震荡1丑,8000谤辫尘,25℃,离心10尘颈苍

上清液(μ尝)

100

100

试剂叁(μ尝)

100

100

充分混匀,90℃水浴5尘颈苍,待冷却后,于微量石英比色皿/96孔板中测定508苍尘吸光值,分别记为础对照管和础测定管,△础=础测定管-础对照管。

 

计算公式:

a.        用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.2525x - 0.034,R? = 0.9917

酶活单位定义:每驳土样每天催化生成1尘驳还原糖为一个酶活力单位。

S-AL(mg/d /g 鲜重)=(△A +0.034)÷ 0.2525×V反总÷W÷T

 

= 10.464×(△A +0.034)÷W

痴反总:反应体系总体积,0.11尘尝;罢:反应时间,1/24诲;奥:样本质量,驳。

 

产.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y = 0.1263x - 0.034,R? = 0.9917

酶活单位定义:每驳土样每天催化生成1尘驳还原糖为一个酶活力单位。

S-AL(mg/d/g)=(△A +0.034)÷ 0.1263×V反总÷W÷T

=20.928×(△A +0.034)÷W

V反总:反应体系总体积,0.11mL;T:反应时间,1/24d; W:样本质量,g。


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